Ditte & Louise er baseret på tv-serien af samme navn, hvor skuespillerne Ditte Hansen og Louise Mieritz spiller alternative versioner af sig selv. Da det går op for de to midaldrende kvinder, at de kun får roller som nogens mor, tager Ditte en radikal beslutning. Hun beslutter sig for at forklæde sig som mand for at prøve lykken.