En reporter blir drept på vei til jobb. En klarsynt mann ser udåden i ett av sine syner, men utenforstående krefter hindrer ham i å se gjerningspersonen. Politiet etterforsker saken, men finner snart ut at det kan ligge en større konspirasjon bak enn de først hadde trodd. Mens puslespillbitene faller på plass, blir doktor Mabuse, som lenge har blitt antatt å være død, utpekt som den potensielle hjernen bak lovbruddene. Dr. Mabuses 1000 øyne er den fjerde filmen om den myteomspunne doktoren, og ble Fritz Langs siste film.